MILE米乐本试剂盒仅限于科学研究用途，不得用于医学诊断。微量转铁蛋白(MTF)的ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。该试剂盒通过将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，经过温育和彻底洗涤后进行检测。底物TMB在过氧化物酶的催化下形成蓝色，随后在酸性环境中转化为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关。最后，利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）以计算样品浓度。

样品的收集、处理及保存方法如下：

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，尽量避免细胞刺激，收集血液后以3000转/分钟离心10分钟，迅速分离血清和红细胞。

2. 血浆：采用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理，3000转/分钟离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液：对样品进行3000转/分钟离心10分钟，以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织用适量生理盐水捣碎，之后3000转/分钟离心10分钟以获得上清。

5. 保存：若采集的样本未能及时检测，应按一次用量分装并在-20℃下存储，避免反复冻融，并在室温下自然解冻，确保样品充分均匀解冻。

在操作时应注意以下事项：

本试剂盒的组成中，标准品（S0-S5）的浓度依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂的准备包括将20×洗涤缓冲液按1:20稀释，具体为1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

为了绘制标准曲线，请在Excel中设置标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制线性回归曲线并根据曲线方程计算样本浓度值。

请注意，MILE米乐对本试剂盒的使用效果不作任何保证。