本试剂盒仅供科学研究使用，不得用于医学诊断。人转铁蛋白受体（TFR）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验（ELISA）原理进行检测。首先，将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次添加至预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，经过温育后进行彻底洗涤。随后，使用TMB底物显色，在过氧化物酶的催化下，TMB转化为蓝色，并在酸的作用下转变为最终的黄色，显色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关。最后，在450 nm波长下用酶标仪测定吸光度（OD值），以计算样品浓度。

样本的收集、处理及保存方法如下：1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作时避免细胞刺激。血液收集后，3,000转离心10分钟，迅速仔细分离血清和红细胞。2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝；后续需在3,000转离心30分钟后取上清。3. 细胞上清液：在3,000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合并捣碎，再进行3,000转离心10分钟取上清。5. 保存：如不及时检测样本，请按一次用量分装并在-20℃冷冻保存，避免反复冻融，室温解冻时需确保样品充分均匀解冻。

在操作时，请注意以下事项: 本试剂盒包含标准品（S0-S5），其浓度依次为：0、25、50、100、200、400 pg/mL。试剂准备方面，20×洗涤缓冲液需按1:20比例稀释，即将1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水混合。

为判断结果，需在Excel中绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，绘制线性回归曲线，并根据曲线方程计算各样本的浓度值。

免责声明：在使用MILE米乐品牌的ELISA试剂盒过程中，使用者需遵循相关实验室规范，以确保实验的准确性与安全性。