MILE米乐致力于生物医疗领域的研究，药物代谢是创新药物研发的重要环节，它直接影响药物制剂的成功与否，同时也与药物研发的效率和质量紧密相关。肝脏作为药物代谢的主要场所，体外代谢模型通常基于肝脏。当前，常用的体外代谢方法包括肝微粒体、重组P450酶、肝细胞、肝脏离体灌流法和肝切片法。其中，肝微粒体和肝细胞的体外孵育法因其操作简便、代谢迅速和良好的重现性而得到了广泛应用，适用于药物代谢酶抑制及体外清除等方面的研究。

药物的Ⅱ相代谢反应是指药物在体内经历化学变化后形成代谢产物。肝脏作为主要的代谢器官，通过药物代谢酶进行Ⅰ相和Ⅱ相的代谢反应，其中Ⅱ相代谢又称结合反应，涉及Ⅰ相代谢产物或原药与内源性小分子的结合，比如葡萄糖醛酸、甘氨酸等。在Ⅱ相代谢过程中，药物一般转化为无活性的代谢物，并且其极性增加，以便排出体外。葡萄糖醛酸结合反应是最重要且常见的生物转化过程，通常由UGT（尿苷酸转移酶）介导。UGT家族仅次于CYP450家族，是人类第二大的药物代谢酶，其催化的葡萄糖醛酸化反应能显著提高脂溶性小分子的水溶性，使其更易排出体外。

在药物的Ⅱ相代谢中，葡萄糖醛酸结合反应显著影响药物的口服生物利用度和体内药动学，还与药物与药物、药物与食物的相互作用，以及一些疾病的发展密切相关，如高胆红素血症、癌症和自身免疫性肝炎。因此，开发合理的体外代谢模型对于研究药物的Ⅱ相代谢反应至关重要。目前，主要使用的体外代谢模型包括肝微粒体和肝细胞。

肝微粒体体外孵育法

微粒体是通过细胞匀浆和差速离心制备而成，主要由破碎的内质网自我融合形成，包含内质网膜和核糖体等基本成分，具有进行蛋白质合成和脂类合成的基本功能。它广泛存在于肝脏等多个器官中，能够提供多种药物的代谢途径。在Ⅱ相代谢稳定性研究中，肝微粒体体外孵育体系是将肝微粒体与氧化还原型辅酶结合，利用微粒体中的糖醛酸转移酶在模拟生理条件下进行生化反应的体系。

孵育体系构建

推荐的孵育体系含有200µL的总体积，包含磷酸缓冲液、NADPH再生系统、UGT孵育系统及肝微粒体蛋白等，反应在37°C水浴中进行，能够有效验证Ⅱ相代谢稳定性。数据通过分析时间点浓度与初始浓度的变化，推导出化合物的半衰期及清除率。

肝细胞体外孵育法

除了肝微粒体，原代肝细胞也是Ⅱ相代谢稳定性试验中常用的体外模型。与肝微粒体相比，原代肝细胞能保持完整的细胞特性及生理水平的酶和辅因子，涵盖了肝脏的所有代谢途径。因此，原代肝细胞被看作是构建体外肝脏模型的金标准，广泛应用于药物相互作用、药物代谢及药物毒性研究。

通过对原代肝细胞与阳性药物的共同孵育，我们能够获得有效的药物代谢数据，包括半衰期和清除率。原代肝细胞展示了活性高、批次间稳定性小及纯度高等优点。研究结果为Ⅱ相代谢在药物研发中的重要性提供了数据支持，帮助评估代谢途径并优化药物设计。

MILE米乐在生物医疗领域提供各种高质量的生物试剂，助力药物早期研发与生命科学的探索。我们注重产品质量，致力于为客户提供最佳的实验支持。我们的产品包括具有稳定性的肝微粒体和肝细胞等，力求为广大的科研工作者提供更多便捷的选择。欢迎咨询，咨询热线：400-127-6686。